Poly I∶C联合BCG-CpG复合佐剂对结核亚单位疫苗免疫效果的影响
摘要
目的探讨聚肌胞苷酸（Poly I∶C）联合BCG-CpG复合佐剂（BCG-CpG-DNA＋Al,简称BC02）对结核亚单位疫苗的免疫效果是否有增强作用。方法 BALB/c小鼠分成5组,3组分别免疫含有不同剂量poly I∶C（10、25、50μg/剂）的结核亚单位疫苗（Ag85b＋ESAT6-CFP10）/（BC02＋poly I∶C）3针,间隔10 d;2组分别免疫PBS或（Ag85b＋ESAT6-CFP10）/BC02作为对照。末次免疫后第7 d,分离脾淋巴细胞,进行抗原特异性的IFN-γELISPOT检测、ELISA检测和淋巴细胞增殖检测以评价细胞免疫应答。豚鼠分成4组,1组免疫含有50μg poly I∶C/剂的新亚单位疫苗（Ag85b＋ESAT6-CFP10）/（BC02＋poly I∶C）3针,间隔10 d;3组分别免疫（Ag85b＋ESAT6-CFP10）/BC02疫苗、生理盐水和BCG作为对照。末次免疫30 d后,每只豚鼠皮下攻击250 CFU结核分枝杆菌。41 d后,解剖豚鼠,进行肝、脾、肺脏器综合病变评分和脾菌计数以评价保护力。结果含不同剂量poly I∶C的（Ag85b＋ESAT6-CFP10）/（BC02＋poly I∶C）疫苗免疫组小鼠的脾淋巴细胞分别经Ag85b和ESAT6-CFP10多肽刺激后,分泌IFN-γ的抗原特异性T细胞频数、IFN-γ分泌量和细胞增殖指数均较（Ag85b＋ESAT6-CFP10）/（BC02）组大幅度提高,且应答强度与poly I∶C呈现较为明显的量效关系。（Ag85b＋ESAT6-CFP10）/（BC02＋poly I∶C）组豚鼠脏器综合病变指数（27.5±20.4）和脾菌分离数[（4.22±0.59）log10CFU]均低于（Ag85b＋ESAT6-CFP10）/BC02组[35.8±27.3,（5.19±0.66）log10CFU],其中脾菌分离数的差异有显著统计学意义（P=0.003 0）。结论 Poly I∶C佐剂对结核亚单位疫苗（Ag85b＋ESAT6-CFP10）/BC02诱导的细胞免疫应答和抗结核保护力均有一定的增强效果。