L-单甲基-精氨酸对兔实验性膝关节骨关节炎Caspases-3、Bax和Bcl-2的影响
摘要
目的：阐明L-单甲基-精氨酸（L-NG-monomethyl-arginine,L-NMMA）对兔实验性膝关节骨关节炎关节软骨细胞凋亡的影响机制。方法：选取30只实验性大白兔随机分为正常组（A组）、模型组（B组）、L-NMMA低剂量治疗组（C组）、L-NMMA中剂量治疗组（D组）和L-NMMA高剂量治疗组（E组）,总共5个组,每组6只。采用原位凋亡染色（TUNEL）和流式细胞术检测软骨细胞的凋亡状况;采用蛋白质印迹（western-bloting）法检测各组软骨组织半胱天冬氨酸蛋白酶3（Caspases-3）的表达;采用免疫组织化学方法检测软骨组织Bcl-2相关X蛋白（Human Bcl-2 associated X protein,Bax）和重组人B细胞淋巴瘤因子2（B-Cell Lymphoma-2,Bcl-2）的表达。结果：（1）模型组兔关节软骨细胞的凋亡率和凋亡指数明显高于正常组（P〈0.01）,且随着L-NMMA治疗浓度的提高,凋亡率和凋亡指数明显下降（P〈0.05）;（2）模型组兔关节软骨组织Caspases-3的表达水平明显高于正常组（P〈0.01）,随着L-NMMA治疗浓度提高,Caspases-3表达水平明显下降（P〈0.05）;（3）模型组兔关节软骨组织Bax的表达水平明显高于正常组（P〈0.01）,随着L-NMMA治疗浓度提高,Bax的表达水平明显下降（P〈0.05）;模型组兔关节软骨组织Bcl-2的表达水平与正常组无明显差异性（P〉0.05）,随着L-NMMA治疗浓度的提高,Bcl-2的表达水平明显上升（P〈0.05）;随着L-NMMA治疗浓度的提高,Bcl-2/Bax数值明显上升（P〈0.05）。结论：L-NMMA可明显降低关节软骨组织Caspases-3的表达水平,可能通过上调Bcl-2/Bax的数值而抑制关节软骨细胞的凋亡,从而为发现阻止OA病变进展的新治疗方法提供实验依据。