铜对仔猪关节软骨细胞TGF-β mRNA基因表达的影响
摘要
分离、培养仔猪关节软骨细胞,从中提取总RNA,用RT-PCR法扩增出TGF-β的cDNA,与pMD18-T载体相连,转化JM109大肠杆菌,提取质粒,鉴定所扩增片断为目的片断后,培养仔猪关节软骨细胞,并在培养液中添加不同水平的铜,分别在0、12、24、48 h培养结束时,收集细胞,提取细胞总RNA.采用RT-PCR法扩增出TGF-β的cDNA,以β-actin为内参,用凝胶分析系统对扩增出的cDNA进行扫描分析,以TGF-β的cDNA的光密度值与β-actin的cD-NA的光密度值之比作为TGF-βmRNA基因表达的相对水平.结果表明,细胞培养液中添加不同水平的铜能促进软骨细胞中TGF-β mRNA基因表达,其中以31.2 μmol/L效果最佳.
引用本文(GB/T 7714)
钱剑, 刘国文, 付世新, 等. 铜对仔猪关节软骨细胞TGF-β mRNA基因表达的影响[J]. Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni, 2005.
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