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重组腺病毒Ad-LMP-1感染大鼠骨髓间充质干细胞

赵忠海、朱悦、林乐、阿良、李洪秋

2010Acta Scientiarum Naturalium Universitatis SunyatseniMedicine被引 0

摘要

背景：LIM矿化蛋白1（LIM Mineralization protein,LMP-1）是一种细胞内非分泌蛋白,可以通过招募众多的成骨因子共同参与成骨细胞的分化。LMP-1在成骨上游水平发挥的强大作用提示了其在骨骼重建方面具有巨大的应用潜力。目的：观察重组腺病毒Ad-LMP-1感染骨髓间充质干细胞的效果,及对其分化的影响。方法：大鼠骨髓间充质干细胞分离培养,传代后,检测特异性标记物CD44的表达情况,矿化液诱导细胞成骨分化后用茜素红染色鉴定。感染重组腺病毒Ad-LMP-1后通过观察绿色荧光蛋白表达情况计算转染效率,RT-PCR及Westernblot验证感染效果,观察感染Ad-LMP-12,7,14d后骨髓间充质干细胞的形态变化和对细胞增殖活力的影响。结果与结论：传代细胞形态一致,排列紧密。矿化液诱导后,细胞形态明显改变。茜素红染色结果表明,诱导后出现钙化结节。观察绿色荧光蛋白信号表明重组病毒Ad-LMP-1感染骨髓间充质干细胞效率在85%左右。感染重组腺病毒Ad-LMP-1后第7天出现了细胞形态改变,14d出现类钙化结节,但不伴有细胞增殖活力改变。结果提示重组腺病毒Ad-LMP-1可以有效地感染原代培养的骨髓间充质干细胞,并诱导其向成骨细胞分化。

引用本文（GB/T 7714）

DOI：https://doi.org/10.3969/j.issn.1673-8225.2010.19.007