大鼠胆管上皮细胞的分离、鉴定及纯度、活性分析
摘要
按Higgins等方法制作大鼠2，3肝切除（parital hepatectomy，PH）模型，用两步灌流法分散肝脏细胞，在32％～90％Percoll密度梯度离心法的基础上进一步用免疫磁珠分离胆管上皮细胞（biliary epithelial cell，BEC），用γ-谷氨酰转肽酶（γ-glutamyltransferase，GGT）和角蛋白19（cyto-keratin 19，CK19）免疫组织化学定性、定位再生肝（regenerating liver，RL）、分散的肝脏细胞及分离的胆管上皮细胞，用RT—PCR定量胆管上皮细胞的GGT和CK18 mRNA，用蛋白免疫印迹定量胆管上皮细胞的GGT、角蛋白18（cytokeratin 18，CK18）．初步证实分离的细胞中GGT和CK19阳性细胞占96％以上，从PH后各时间点分离的胆管上皮细胞的GGT和CK18 mRNA量稳定，相应的蛋白量亦稳定．表明改进的分离胆管上皮细胞方法具有收率和纯度高、活性好等特点，方便适用．
引用本文（GB/T 7714）
李永霞, Lei Wang, 谢来峰, 等. 大鼠胆管上皮细胞的分离、鉴定及纯度、活性分析[J]. 河南科学, 2009.
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