亚洲牛带绦虫Spef1-Like基因克隆、表达及纯化
摘要
目的扩增、克隆和表达亚洲牛带绦虫(Taenia saginata asiatica) Spef1-Like基因全长cDNA, 并进行表达产物的纯化. 方法以亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库中含Spef1-Like基因的质粒作为模板, 扩增该基因, 将其克隆到原核表达载体pET-28a (+)中, 测序鉴定重组质粒, 在大肠埃希菌BL-21/DE3中用异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导, 表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定, 重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化. 结果PCR, 双酶切及DNA测序见过均表明重组质粒pET-28a (+)-Spef1-Like构建成功, 该基因在大肠埃希菌中以上清表达, 纯化后蛋白通过SDS-PAGE鉴定结果表明该基因在大肠埃希菌BL-21/DE3得到高效表达. 结论成功克隆了亚洲牛带绦虫Spef1-Like基因, 并表达和纯化了Spef1-Like蛋白, 为研究Spef1-Like的功能及其疫苗等研究提供了基础依据.
引用本文（GB/T 7714）
王杰, Wang Jie, 戴佳琳, 等. 亚洲牛带绦虫Spef1-Like基因克隆、表达及纯化[J]. 未知来源, 2009.
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