心肌缺血再灌注中肿瘤坏死因子—α表达及与核因子—kB活化的关系
摘要
目的:研究心肌缺血-再灌注时心肌组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达与心肌核因子-kB(NF-kB)活化之间的关系.方法:新西兰兔200只分为:①缺血-再灌注组(IR):结扎兔左冠状动脉前降支造成心肌缺血45min后再开放;②吡咯基二硫氨基甲酸酯(PDTC)预处理组(IR+PDTC):在心肌缺血前10分钟静脉注射PDTC(15mg/kg);③抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体预处理组(IR+Anti-TNF-α-mAb):在心肌缺血前10分钟静脉注射抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体;④假手术对照组(Sham).每组又分缺血前(0),再灌注后30、60、90、120、240、360min时相点.用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定心肌组织中TNF-α的表达,凝胶电泳迁移率(ESMA)分析检测心肌组织NF-kB的活性,髓过氧化酶法(MP0)定量测定心肌组织中浸润的中性粒细胞.结果:与缺血前比较,在缺血-再灌注组中心肌再灌注30min后NF-kB活性开始增高,120min达到高峰,之后活性有所下降,但仍明显高于缺血前(P＜0.05);心肌TNF-α的表达在心肌再灌注120min明显增高(P＜0.05),并持续保持在高水平状态,并与中性粒细胞浸润升高有相关性(r=0.764,P＜0.05);在IR+PDTC及IR+Anti-TNF-α-mAb组,PDTC、Anti-TNF-α-mAb均能抑制NF-kB的活化、减少TNF-α的表达及中性粒细胞浸润,与IR组比较均有显著差异(P＜0.05).其中PDTC的作用强于Anti-TNF-α-mAb(P＜0.05).结论:心肌缺血-再灌注能刺激心肌NF-kB的活化,活化的NF-kB启动TNF-α的表达而参与缺血-再灌注损伤的发生过程.而TNF-α的表达对心肌NF-kB的活化有反馈激活作用.