重组腺病毒ΔN IκBα的构建及其对A549细胞中NF-κB活性的抑制
摘要
目的:探讨△N IkBα基因对NF—kB活性的调节作用。方法:构建去除Ser^32和Ser^36磷酸化位点的IkBα重组腺病毒——Ad—△N IkBα。A549细胞分为3组:即LPS组、Ad—LacZ+LPS组和Ad—△N IkBα+LPS组.LPS组单纯用内毒素(LPS)激活NF—kB;Ad—LacZ+LPS组及Ad—△N IkBα+LPS组在用LPS前2d,分别感染Ad—LacZ和Ad—△N IkBα。用western blot、电泳迁移率变动分析(EMSA)和ELISA法分别检测LPS刺激后5h,细胞总蛋白中NF—kB的活性和培养上清中TNF—α及IL-6的含量。结果:Ad—△N IkBα+LPS组NF—kB的活性,TNF—α和IL-6的含量,均显著低于LPS组及Ad—LacZ+LPS组。结论:突变后的IkBα可明显抑制NF—kB活化,减少TNF—α和IL-6的释放,有望成为一种强有力的抗炎治疗制剂。
引用本文(GB/T 7714)
朱自路, 程志祥, 熊俊, 等. 重组腺病毒ΔN IκBα的构建及其对A549细胞中NF-κB活性的抑制[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2005.
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