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HIV-1 vif基因人工miRNA的构建和功能分析

王芳宇、周云、何丽芳、滕涛、Hai Yang、陈小卫

2013Acta Scientiarum Naturalium Universitatis SunyatseniBiochemistry, Genetics and Molecular Biology被引 0

摘要

目的构建人工miR－vif，并研究其对HIV－1感染宿主细胞的影响。方法以miR－155为基础骨架，根据HIV－1 vif基因序列设计并合成4对miRNA寡聚单链DNA，构建4个人工miR－vif。采用qPCR技术检测其对vif基因的沉默效率和对干扰素表达的影响；MTT法测定其对被转染细胞的毒性；HIV．1假病毒实验技术检测其对感染的抑制作用。结果qPCR结果显示，4个人工miR－vif对vif基因都具有一定的沉默效果，其中miR－vif－1的沉默效率最高，达68％。且不会对细胞干扰素的表达产生影响。MTT实验证实miR－vif－1不会影响被转染细胞的活性，此外，HIV－1假病毒实验显示，miR－vif－1对HIV－1 p24的抑制作用达66．5％，效果明显。结论所获得的miR－vif－1对HIV－1的复制具有良好的抑制作用，可为进一步的抗HIV－l感染研究提供基础。

引用本文（GB/T 7714）