可溶性重组日本血吸虫26 kDa GST的优化表达
摘要
目的探讨在大肠杆菌中表达可溶性重组日本血吸虫谷胱甘肽孓转移酶（rSj26 GST）的优化条件。方法用含有Sj26基因的原核表达载体pGEX-3X转化大肠杆菌BL21（DE3），将影响可溶性rSj26 GST表达的4个因素，即温度、诱导剂IPTG浓度、诱导时细菌的密度和诱导时间进行正交设计，确定其优化表达条件并大量表达，采用谷胱甘肽亲和层析法纯化表达的蛋白，测定酶活性，通过Western blot鉴定免疫活性。结果正交设计的直观分析和方差分析结果显示：可溶性rSji26 GST最佳表达条件为温度25℃，IPTG的浓度1mmol／L，诱导前细菌的生长密度0．9，诱导表达时间8h。可溶性rSj26GST纯化的产量为16mg／L，Western blot证实rSji26 GST具有良好免疫原性和免疫反应性。结论通过正交设计确定了可溶性rSji26 GST在大肠杆菌中表达的优化条件。
引用本文（GB/T 7714）
余光清, 蒋诗琴, 李雍龙. 可溶性重组日本血吸虫26 kDa GST的优化表达[J]. Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni, 2006.
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