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shRNA逆转耐阿霉素人乳腺癌细胞株（MCF-7／AdrR）的多药耐药性

干惠珠、张桂珍、张凤春、卜丽莎、杨绍娟、高申、郑德明

2006中国肿瘤生物治疗杂志Biochemistry, Genetics and Molecular Biology被引 0

摘要

目的：利用短发夹RNA（short hairpin RNA，shRNA）表达载体逆转耐阿霉素人乳腺癌细胞株（MCF-7／AdrR）的多药耐药性（muhidrug resistance，MDR）。方法：构建2个MDR1基因shRNA表达质粒，稳定转染MCF-7／AdrR细胞。RT-PCR分析MDR1基因mRNA的表达，Western blotting检测P-糖蛋白（P-gP）的表达，流式细胞术和MTT法分别检测乳腺癌细胞的凋亡和对阿霉素的敏感性，激光共聚焦荧光显微镜检测细胞内柔红霉素的稳态积累。结果：稳定转染pSilencer^TM 3．1-H1 neo MDR1-A和MDR1-B shRNA表达质粒的MCF-7／AdrR细胞，RT-PCR结果显示MDR1基因mRNA表达分别减少到37．6％和28．0％，Western blotting结果显示P—gP表达被明显而特异地抑制。转染细胞对阿霉素的耐药性由162倍分别减低到108倍和50倍，并且MDR1 shRNA表达质粒增加MCF-7／AdrR细胞内柔红霉素的积累。MDR1 shRNA表达质粒和阿霉素联合应用可诱导MCF-7／AdrR细胞的凋亡。结论：shRNA表达质粒有效地逆转多药耐药，使耐药的肿瘤细胞恢复对化疗药物的敏感性。

引用本文（GB/T 7714）