定点突变提高里氏木霉木聚糖酶(XYN II)的稳定性
摘要
通过定点突变的方法,在来源于里氏木霉Trichderma reesei的木聚糖酶XYNII的N-末端两个β折叠片层间添加二硫键,以提高木聚糖酶的稳定性。原酶XYN-OU和突变酶XYN-HA12(T2C、T28C和S156F)分别在毕赤酵母中分泌表达,突变酶与原酶纯化后进行酶学性质比较。结果表明:突变酶最适反应温度由50℃提高到60℃;在70℃的半衰期由1min提高到14min;最适反应pH为5.0,与原酶保持一致,但是在50℃、30min条件下的pH稳定范围由4.0-9.0扩展到3.0-10.0。对木聚糖酶分子改良的结果反映出在β片层间添加二硫键可以有效改善酶在较高温度下三维结构的刚性,提高热稳定性。
引用本文(GB/T 7714)
韩承业, 余世袁, 欧阳嘉, 等. 定点突变提高里氏木霉木聚糖酶(XYN II)的稳定性[J]. 生物工程学报, 2010.
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