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核因子NF-κB p65亚基TAD的克隆及表达

侯春丽、应大君、魏勇

2007Acta Scientiarum Naturalium Universitatis SunyatseniMedicine被引 0

摘要

目的 获得NF-κB p65亚基转录激活区域（transcription activation domain，TAD），构建真核表达载体并在内皮细胞中检测其表达。方法 培养人脐静脉内皮细胞，提取总RNA，经RT—PCR得到p65TAD基因片段，测序正确后插入带有绿色荧光蛋白的真核表达载体pEGFP—N1，构建表达载体pEGFP—N1一p65TAD，然后转染内皮细胞，荧光显微镜下观察表达情况，同时用Western blot分析蛋白的表达。结果 有效地扩增了p65 TAD 783 bp的目的基因片段。酶切结果表明所构建的含p65TAD基因的质粒与设计相同。p65TAD在脐静脉内皮细胞中得到了高效的表达。结论 成功地构建了p6STAD的真核表达载体并实现了在内皮细胞中的高效表达。

引用本文（GB/T 7714）