脂氧素A4对肺泡II型上皮细胞水通道蛋白1，3，5的影响
摘要
目的探讨脂氧素A4（LipoxinA4，LXA4）对脂多糖（hpopolysaccharide，LPS）攻击的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（type Ⅱpenumonocyte，ATⅡ）水通道蛋白（aquaporin，AQP）1，3，5的影响。方法每次取SPF级健康SD雄性大鼠，体质量200～250g一只，对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞进行分离、纯化，鉴定，得到纯度为≥90％的肺泡Ⅱ型上皮细胞，将细胞随机分为：①溶剂对照（乙醇，0．7μL／mL）组；②空白组（无血清的培养基不含任何药物）；③LXA4（1×10^-7mol／mL）组；④LPS（1μg／mL）组；⑤LPS＋LXA4（1μG／mL LPS＋1×10^-7mol／mL LXA4）组。药物刺激4h后用逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）检测大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞上AQP1，AQP3和AQP5的mRNA的表达，免疫组织化学方法（IHC）检测肺泡Ⅱ型上皮细胞上AQP1，AQP3和AQP5蛋白的表达。试验重复6次。采用方差分析进行统计学处理。结果RT-PCR和免疫组织化学法结果显示，用1μg/mL的LPS刺激肺泡Ⅱ型上皮细胞4h后ATⅡ上AQP1，AQP3和AQP5的mRNA和蛋白表达较空白组明显减低（P〈0．01），而LPS＋LXA4组中ATⅡ上AQP1，AQP3和AQP5的mRNA和蛋白表达较LPS模型组有明显增高（LPS＋LXA4，AQP1：0.647±0．132，AQP3：0．900±0．856，AQP5：0．879±0．058；LPS，AQP1：0．297±0．133，AQP3：0．512±0．113，AQP5：0．647±0．110；P〈0．01），且LXA4组中ATⅡ上AQP1，AQP3和AQP5的mRNA和蛋白表达较空白组也有明显增高（LXA4，AQP1：0．539±0．142，AQP3：0．818±0．176，AQP5：0．841±0．066；Blank Control，AQP1：0．518±0．139；AQP3：0．138±0．136，AQP5：0．755±0．066；P〈0．01）。结论大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞上表达有AQP1，AQP3和AQP5，LXA4能促进脂多糖攻击的肺泡Ⅱ型上皮细胞上AQP1，AQP3和AQP5mRNA和蛋白表达上调。