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重组人TGF-β1对TGF-β1基因启动活性的影响

包广宇高春芳仲人前孔宪涛

2005中国免疫学杂志Biochemistry, Genetics and Molecular Biology被引 0

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摘要

目的:探讨TGF-β1对人TGF-β1基因自身启动子活性的影响.方法:以人全血基因组DNA为模板,PCR扩增获得TGF-β1基因转录起始位点上游5′端-1 328~+812 bp和+227~+812 bp的片段,以此作为启动子与含氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因而不含启动子的pCAT-enhancer质粒构建成重组质粒,并将其转染至大鼠星状细胞株nFSC中,细胞在DMEM培养基中进行培养,用不同浓度的TGF-β1进行干涉,测定并比较细胞的CAT表达水平.结果:不同浓度的TGF-β1对大鼠的肝脏星状细胞的增殖具有抑制作用, 而且这种抑制作用在实验用的浓度范围内具有剂量依赖关系;浓度为2.5 ng/ml TGF-β1可以使转染phTGF0.585、phTGF1.120、phTGF1.423、phTGF1.680、phTGF2.140质粒的大鼠肝星状细胞的CAT活性分别增加2~5倍.结论:TGF-β1在大鼠nFSC细胞中对TGF-β1启动子活性具有自身促进作用,为进一步研究TGF-β1的调节机制提供了依据.

引用本文(GB/T 7714)

包广宇, 高春芳, 仲人前, 等. 重组人TGF-β1对TGF-β1基因启动活性的影响[J]. 中国免疫学杂志, 2005.

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