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重组腺病毒Ad—IL-12感染淋巴细胞对人卵巢癌细胞SKOV3增殖和凋亡的影响

王秦、成凤、匡文斌、董晋豫、马婷婷、熊海玉、涂植光

2013基础医学与临床Biochemistry, Genetics and Molecular Biology被引 0

摘要

目的探讨重组腺病毒Ad—IL-12感染人外周血淋巴细胞后对人卵巢癌细胞SKOV3周期、增殖和凋亡的影响。方法采用重组人IL-2腺病毒（Ad—IL-12）感染人外周血淋巴细胞，感染48h后与人卵巢癌细胞SKOV3共培养（SKOV3／Ad—IL-12），同时设未感染组（SKOV3）和Ad—GFP空载感染组（SKOV3／Ad—GFP）作为对照。RT—PCR检测IL-12双亚基P35和P40的mRNA表达，ELISA检测细胞培养上清中IL-12P70蛋白的分泌，CCK8法检测卵巢癌细胞增殖，流式细胞术分析卵巢癌细胞周期和凋亡，RT—PCR和Westernblot检测抗凋亡蛋白BCL-2、survivin的表达。结果重组腺病毒Ad-IL—12可成功感染人外周血淋巴细胞，分泌较高水平的IL-12 P70蛋白；淋巴细胞过表达IL-12可抑制SKOV3细胞的增殖；与未感染组和空载组相比，SKOV3／Ad—IL-12组G1期细胞显著增加，凋亡率显著升高（P〈0．05），SKOV3细胞中抗凋亡蛋白BCL-2和survivin显著下调（P〈0．05）。结论人IL—12基因重组腺病毒可以成功感染人外周血淋巴细胞，分泌IL-12 P70蛋白，并可以通过阻滞细胞周期进程和促进细胞凋亡抑制人卵巢癌细胞SKOV3的增殖。

引用本文（GB/T 7714）