尼古丁对哮喘大鼠树突状细胞髓样分化因子88及白介素-10、白介素-12表达的影响
摘要
目的通过研究尼古丁对哮喘大鼠模型树突状细胞（DCs）Toll受体转导途径中重要接头蛋白髓样分化因子88（MyD88）表达影响及其与白介素-10（IL-10）、白介素-12（IL-12）的关系,从细胞水平探讨尼古丁加重哮喘的免疫学机制。方法制备哮喘大鼠模型,培养骨髓来源的DCs及脾脏来源的淋巴细胞,实验随机分为4组：对照组、哮喘组、尼古丁组和哮喘加尼古丁组,其中对照组和哮喘组大鼠DCs在培养5 d后在培养液中加入一定体积的PBS继续培养72 h,尼古丁组和哮喘加尼古丁组大鼠DCs在培养5 d后加入质量浓度为400μg/ml尼古丁作用72 h。收集各组细胞及细胞上清,采用酶联免疫吸附双抗体夹心法（ELISA）测定各组IL-10和IL-12的浓度。采用免疫印迹（Western blot）法测定细胞内MyD88的含量。采用MTT法测定DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力。结果①哮喘加尼古丁组和哮喘组大鼠DCs IL-10的表达均高于对照组,IL-12的表达均低于对照组,差异均具有统计学意义（P〈0.01）。哮喘加尼古丁组大鼠DCs IL-10和IL-12的表达均低于哮喘组大鼠,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。②尼古丁组、哮喘组和哮喘加尼古丁组大鼠DCs MyD88的表达低于对照组,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。哮喘加尼古丁组大鼠DCs MyD88的表达低于哮喘组,差异均具有统计学意义（P〈0.01）。③哮喘组大鼠DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力与对照组相比明显增强,差异具有统计学意义（P〈0.01）。哮喘加尼古丁组大鼠DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力与哮喘组和对照组相比明显减弱,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。④DCs MyD88的表达与IL-12呈显著的正相关（r=0.644,P〈0.01）,与IL-10的表达无明显相关性。IL-12与IL-10的表达呈显著的负相关（r=-0.388,P〈0.05）。DCs中IL-10的表达与淋巴细胞增殖活性呈显著的正相关（r=0.524,P�