毕赤酵母Mut^+和Mut^s重组子表达美洲商陆抗病毒蛋白基因的比较
摘要
将N末端信号肽和C末端毒性区域缺失突变的美洲商陆抗病毒蛋白(pokeweed antiviral protein,PAP)基因表达载体pPIC9K-P酶切线性化后,通过电击转化整合到巴氏毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115菌株细胞中,PCR筛选出表型为利用甲醇快速型(Mut+)的重组子.在相同培养条件下比较Mut+重组子和利用甲醇缓慢型(Muts)重组子在表达缺失突变型PAP方面的异同.结果表明,诱导培养48 h后,Mut+重组子表达产物在SDS-PAGE胶上可见清晰目的带,而Muts重组子培养72 h才能见到微弱的目的带.抗病毒活性实验表明Mut+重组子和Muts重组子的表达产物均对TMV病毒侵染有明显的抑制作用,它们的抗病毒活性没有显著的差异.
引用本文(GB/T 7714)
周倩, 王锡锋, Li Li, 等. 毕赤酵母Mut^+和Mut^s重组子表达美洲商陆抗病毒蛋白基因的比较[J]. 植物病理学报, 2003.
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