过氧化氢对体外培养的人晶状体上皮细胞形态、活性、移行及凋亡的影响
摘要
目的 研究过氧化氢(H2O2)对体外培养的人晶状体上皮细胞形态、存活率、移行及凋亡情况的影响.方法 实验研究.体外培养晶状体上皮细胞株HLECs-B3,用不同浓度(0～1000 μmol/L)H2O2处理晶状体上皮细胞,CCK-8法检测30 min、3、6、12及24 h细胞存活率;光学显微镜下观察H2O2处理24 h后细胞形态及移行的情况;用annexinV/PI试剂盒在流式细胞仪上检测细胞凋亡的情况.实验数据采用两因素方差分析.结果 H2O2处理人晶状体上皮细胞24 h后,对照组细胞形态正常,细胞间连接紧密.随着H2O2浓度的增高,100、300 μmol/L浓度组中,死亡细胞不多,而500、700及1000 μmol/L浓度组死亡的细胞数增多.死亡细胞不再贴壁,悬浮于培养基中,失去原固有形态,呈圆形,折光性明显增高.存余的贴壁细胞变得皱缩,轮廓增强,边缘僵硬.在H2O2处理人晶状体上皮细胞30 min及3 h组中,随着H2O2浓度的升高,细胞存活率有所降低,差异有统计学意义(F30 min=21.45,P30 min＜0.05;F3 h=64.31,P3 h＜0.05).随着处理时间延长,当H2O2处理6 h时,细胞总体存活率降低,差异有统计学意义(F6 h=124.14,P6 h＜0.05).处理12 h时,细胞总体存活率显著降低,差异有统计学意义(F12 h=337.61,P2 h＜0.05).处理24 h时,细胞存活率显著降低,差异有统计学意义(F24 h=268.25,P24 h＜0.05).在无血清情况下用不同浓度的H2O2培养人晶状体上皮细胞24 h,发现各组细胞移行速度有所不同,具体分析发现,前12 h细胞移行速度较快,而后12 h细胞移行速度相对减慢,差异有统计学意义(F=82.21,P＜0.05).选择对照组、100和1000 μmol/L 3个浓度组处理人晶状体上皮细胞24 h后,通过流式细胞仪检测细胞凋亡情况,结果显示3个浓度组的细胞凋亡率总体差异有显著意义(F=7.49,P=0.02),进一步流式分析结果显示,细胞总体死亡率显著高于对照组,差异有统计学意义(F=24.85,P＜0.05).细胞总体存活率则显著低于对照组,差异有�