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颗粒溶素对U937细胞分泌MCP-1、RANTES与TNF-α功能的影响

黄东标、胡晓燕、钱琤、陈燕、周晔、陈波、邓安梅、仲人前

2008临床检验杂志Biochemistry, Genetics and Molecular Biology被引 0

摘要

目的探讨颗粒溶素对U937细胞分泌MCP-1、RANTES与TNF-α功能的影响。方法①在U937细胞中加入终浓度为100ng／ml的乙酰肉豆蔻佛波酯（phorbol myristate acetate，PMA），刺激2d后，再加入不同组合的脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）、葡萄球菌的脂膜酸（lipoteichoic acid，LTA）、颗粒溶素（granulysin，GNLY），刺激培养4h后收集细胞上清，用ELISA检测肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor，TNF-α）的含量。②在U937细胞或原代单核细胞中加入GNLY后，在37℃条件下，刺激4h，收集上清，以ELISA分析MCP-1（monocyte chemoattractant protein-1，单核细胞趋化因子-1）和RANTES（reduced upon activation normal T expression and secreted，正常T细胞活化时表达和分泌减少因子）的含量；收集细胞并抽提总RNA后，以实时荧光定量RT-PCR方法检测部分基因表达水平的改变。结果加入GNLY后，LPS诱导U937细胞分泌的TNF-α水平显著增加（P〈0．05）；U937细胞或单核细胞的MCP-1、RANTES的mRNA水平显著增加（P〈0、05），上清液中MCP-1和RANTES水平也增加（P〈0、05）。结论GNLY可促进LPS诱导单核细胞分泌TNF-α，本身可刺激单核细胞表达MCP-1、RANTES增高，这为以后进一步研究颗粒溶素的作用机制打下了基础。

引用本文（GB/T 7714）