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pEGFP-C1-PTEN的构建及其在乳腺癌细胞ZR-75-1中的表达

武鸿斌、宋燕、谢忠士、刘志毅、姜洋、柳福海、赵航

2008山东医药Biochemistry, Genetics and Molecular Biology被引 0

摘要

采用分子克隆技术构建重组质粒人野生型PTEN绿色荧光蛋白真核表达载体（pEGFP-C1-PTEN），以脂质体转染法转染人乳腺癌细胞株ZR-75-1中，应用RT-PCR、Western印迹法分析目的基因的表达。双酶切和特异PCR结果表明克隆的基因片段约1．2kb，测序法进一步证实该基因为PTEN编码基因，经NCBIBLAST分析与Gene Bank中基因序列完全相同；RT-PCR、Western印迹显示pEGFP-C1-PTEN转染组有PTENmRNA及PTEN蛋白表达。成功构建了人野生型PTEN绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1-PTEN，并将其成功转染入乳腺癌细胞ZR-75-1中，为研究PTEN在肿瘤发生发展中的作用奠定了基础。

引用本文（GB/T 7714）